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TaKaRa PCR Listeria monocytogenes Detection Kit (multi-PCR) China Standard
品牌 Code No. 包装量 价格 说明书 数量
Takara RR267 40 次 1,269 元
 
■ 制品内容 (50 μl反应×40次)
2×Gflex PCR Buffer (Mg2+,dNTP plus) 1 ml
Tks Gflex™ DNA Polymerase (1.25 U/μl) 40 μl
L.mono HA1 Primer (20 μM) 60 μl
L.mono HA2 Primer (20 μM) 60 μl
L.mono MonoA Primer (20 μM) 100 μl
L.mono LisB Primer (20 μM) 100 μl
L.mono Positive Control (2×104 copies/μl)*1 75 μl
RNase Free dH2O 1 ml
 
*1 L.mono Positive Control仅作为反应性能监测的对照,浓度仅供参考。实验时请用阳性标本提取的DNA作为阳性对照。
 
【各种引物序列】
引物名称 引物序列 扩增片段大小
        L.mono HA1 Primer 5′- GCAGTTGCAAGCGCTTGGAGTGAA -3′ 456 bp
        L.mono HA2 Primer 5′- GCAACGTATCCTCCAGAGTGATCG -3′
        L.mono MonoA Primer 5′- CAAACTGCTAACACAGCTACT -3′ 702 bp
        L.mono LisB Primer 5′- TTATACGCGACCGAAGCCAA -3′
L.mono HA1 Primer/L.mono HA2 Primer扩增溶血素基因;L.mono MonoA Primer/L.mono LisB Primer 扩增P60蛋白的编码基因。
 
■ 制品说明
李斯特氏菌是革兰氏阳性的、有鞭毛、无芽孢的短杆菌 (0.4~0.5×0.5~2.0 μm)。在分类学上属于李斯特氏菌属,这个属共有8种菌。其中只有Listeria monocytogenes菌是引起人李斯特氏菌症的病原菌。能引起发热、头痛的同时会引发髓膜炎、败血症、心内膜炎、肺炎等多发性病症。1980年以来作为集体食物中毒的病原菌 (即食物中毒病原菌) 引起人们注意。
本试剂盒是根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《SN/T 0184.2-2006 食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法 第2部分:多重PCR方法》开发的用于检测Listeria monocytogenes的multiplex PCR试剂盒。Tks Gflex DNA Polymerase是在Thermococcus 属古细菌由来的DNA Polymerase的基础上进行改良的PCR聚合酶,该酶能够有效抑制酶与模板DNA的非特异性结合。并具有α型酶特有的高保真性和优良的扩增性。同时体系中添加了Takara特别研发的延伸因子和提高引物特异性的物质,可以实现在很宽的模板浓度范围内进行高速、特异性强的PCR扩增。对于普通PCR酶难扩增 (含有PCR阻害物) 的GC Rich、AT Rich的目的基因均可进行有效扩增。另外其中还添加了能够吸附PCR阻害物的成份和扩增增强因子,对于粗提品也能进行高效的PCR扩增。
本酶添加了在常温下能够抑制DNA Polymerase活性及3’→5’exonuclease活性的抗体,是Hot Start型DNA聚合酶。本检测简单快速,灵敏度高,特异性强。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 注意事项
1. 根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《SN/T 0184.2-2006 食品中单核细胞增生李斯特氏菌检测方法 第2部分:多重PCR方法》,使用本试剂盒方法判断为阳性的样品,建议再选用其他方法,如:API、生化鉴定和协同溶血 (cAMP) 试验等,进行进一步确认。
2. PCR反应是灵敏度非常高的反应。为防止污染,建议从反应液的配制到检测的实验过程中,设定以下3个实验区域,并进行物理性隔离。
  区域1:反应液的配制及分装。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。
  区域2:检测样品的制备。此时不要开闭装有扩增产物或检测样品的Tube管。
  区域3:向反应液中添加检测样品,进行反应、检出。